細胞名稱 | Raw264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 |
貨號 | M003 |
種屬 | 小鼠 |
細胞來源 | ATCC/中科院/協和醫院等地引進 |
生長特性 | 貼壁 單核細胞樣 |
培養條件 | 培養基 :90% DMEM +10% FBS 溫度 :37℃ 氣相:95%空氣 ,5%二氧化碳 |
傳代 | 1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒 ,將其平躺置於培養箱中進行1-3小時的緩衝 ,.然後置於無菌操作台 ,打開瓶口 ,將其中的培養液去掉 ,再往其中加入5-6mL新鮮培養基並置於細胞培養箱中培養 ,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代 ; 2.待細胞長滿瓶底麵積70% ,已有部分細胞開始堆疊時 ,需要對其進行傳代 ,傳代比例為1:3至1 :6 ; 3傳代步驟 :去掉舊培養基後 ,使用細胞刮將細胞刮下 ,再加入培養基重懸傳代 。或去掉舊培養基後 ,加入冷PBS或培養基對細胞進行吹打將其從瓶底分離 。吹打次數不宜過多 ,以免造成細胞損傷 。若懸浮細胞較多 ,可直接用舊培養基吹打細胞 ,吹打完成後吸出培養基 ,1000r/min離心5min ,去上清後加入新鮮培養基重懸傳代 。 |
保存 | 凍存條件 :80%完全培養基+10%FBS+10%DMSO (備注 :建議使用本公司的冷凍液(H-W-100) ,用4度保存的冷凍液直接重懸細胞 ,不能預熱後使用 。) 保存條件 :液氮存儲 |
供應限製 | 僅供研究之用 |
常見問題及解決方案 | 1.培養瓶有破裂 ,培養液有漏液 :細胞極大可能會汙染 ,所以尊龍凱時會及時安排幫老師解決 。 2.收到細胞後盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基 ,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基 ,請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過 72 小時) 3.細胞漂浮 :培養瓶不開封 ,瓶口酒精擦拭後平躺放置在培養箱 。1-2小時後觀察 ,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常 ,剩餘漂浮的細胞可以去掉 ,留8-10ml培養液培養觀察 ,細胞生長至匯合度80% ,進行消化傳代 ;如細胞還是不貼壁 ,將細胞離心收集轉到新培養瓶 ,原培養瓶加部分培養液繼續培養 ,中間注意觀察 ,尊龍凱時的技術人員會一直跟蹤指導 ,直到問題解決 。 |