貨號

R009

種屬

大鼠

細胞來源

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

生長特性

疏鬆貼壁 ，有漂浮的細胞簇 上皮樣

培養條件

培養基 ：F-12K+2.5%FBS　(推薦HAKATA優等胎牛血清 ，貨號:HN-FBS-500）+15%HS(推薦HAKATA馬血清 ，貨號:HM-FBS-500)

溫度 ：37℃     氣相 ：95%空氣 ，5%二氧化碳

傳代

1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒 ，將其平躺置於培養箱中進行1-3小時的緩衝 ，.然後置於無菌操作台 ，打開瓶口 ，將培養基吸出 ，1000r/min離心5min去上清 ，再往其中加入5-6mL新鮮培養基 ，吹打均勻後 ，轉移至原培養瓶並置於細胞培養箱中培養，根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代 ，一般2天換一次液 ；

2.待細胞長滿瓶底麵積70-80% ，需要對其進行傳代 ，傳代比例為1:2-1 ：4 ；

3傳代步驟 ：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置於37℃預熱 ，吸出培養基至離心管 ，往培養瓶中加入1-2 ml PBS ，輕晃洗滌將PBS轉移至離心管 。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶 ，置於室溫孵育消化（第一次消化需置於顯微鏡下觀察 ，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓 、輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間 ，記錄最佳消化時間 ，以便於下次消化） ，消化好後加入3ml完全培養基終止消化 。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞 ，使之完全脫落 ，然後收集細胞懸液至離心管 ，1000rpm離心5min ，棄上清 ，加入完全培養基重懸細胞 ，進行傳代 。

保存

凍存條件 ：70%完全培養基+20%FBS+10%DMSO

(備注 ：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100） ，用4度保存的冷凍液直接重懸細胞 ，不能預熱後使用 。)

保存條件 ：液氮存儲

供應限製

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養瓶有破裂 ，培養液有漏液 ：細胞極大可能會汙染 ，所以尊龍凱時會及時安排幫老師解決 。

2.收到細胞後盡快更換為新鮮培養基 。

3.注意該細胞為輕微貼壁 ，且有較多細胞懸浮 ，需要通過離心的方式收集懸浮細胞再傳代換液 。