BDNF簡介 ：

腦源性神經營養因子（BDNF）是神經營養因子家族中的一員 ，這對中樞神經係統和外周神經係統中某些特定的神經組份的分化和存活是必須的 。BDNF由分泌的前前體蛋白 ，經裂解成信號肽和前體蛋白後 ，前體蛋白裂再裂解成119個氨基酸的成熟蛋白 。BDNF有六個保守的半胱氨酸殘基 ，在蛋白內部形成三個二硫鍵 。與NGF相似 ，活性BDNF被預測為一個非共價結合的同源二聚體 。BDNF 在中樞神經係統中廣泛以自分泌和旁分泌的形式分泌出來 ，具有刺激中樞神經的營養和分化的作用 ，已證明在記憶形成的過程中和染色體調控方麵具有重要的作用 。此外 ，在腦垂體 、脊髓 ，心肌和肺及平滑肌中也有低水平的表達 。BDNF可與其高親和力的受體TrkB酪氨酸激酶受體結合特異性的激活下遊信號通路 。

BDNF在血漿中以pg/ml水平存在 ，但在血清中則以ng/ml水平存 ，該差異明顯是由於血小板中的BDNF的釋放造成差異 。BDNF不同種屬間在結構上的高度的保守性 ，使得BDNF ELISA可以用於其它種屬的BDNF的檢測 。

檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中BDNF的濃度 。BDNF捕獲抗體已預包被於酶標板上 ，當加入標本或參考品時 ，其中的BDNF會與捕獲抗體結合 ，其它遊離的成分通過洗滌的過程被除去 。當加入生物素化的抗BDNF抗體後 ，抗BDNF抗體與BDNF接合 ，形成夾心的免疫複合物 ，其它遊離的成分通過洗滌的過程被除去 。隨後加入辣根過氧化物酶標記的親合素 。生物素與親合素特異性結合 ，親合素連接的酶就會與夾心的免疫複合物連接起來 ；其它遊離的成分通過洗滌的過程被除去 。最後加入顯色劑 ，若樣本中存在BDNF將會形成免疫複合物 ，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質 ，在加入終止液後呈黃色 。通過酶標儀檢測 ，讀其450nm處的OD值 ，BDNF濃度與OD₄₅₀值之間呈正比 ，通過參考品繪製標準曲線 ，對照未知樣本中OD值 ，即可算出標本中BDNF濃度 。

BDNF定量分析酶聯免疫檢測試劑盒組成:

標本收集:

1.標本的收集請按下列流程進行操作 ；

A.細胞上清標本離心去除懸浮物後即可 ；

B.血清標本應是自然凝固後 ，取上清 ，避免在冰箱中凝固血液 ；

C.血漿標本 ，推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測 ，

D.標本收集後請分裝 ，凍存於－20℃ ，避免反複凍融 。

2.血清標本不應添加任何防腐劑或抗凝劑 ；

3.標本應清澈透明 ，檢測前樣本中如有懸浮物應通過離心去除 。

4.請勿使用溶血 ，高血脂或汙染的標本檢測 ，否則結果將不準確 。