貨號

H099

種屬

人

細胞來源

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

生長特性

貼壁  上皮細胞樣

培養條件

培養基 ：DMEM90%+ FBS 10%（推薦HAKATA優等胎牛血清 ，貨號:HN-FBS-50）

溫度 ：37℃     氣相 ：95%空氣,5% CO2

傳代

1. 用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒 ，將其平躺置於培養箱中進行1-3小時的緩衝 ，.然後置於無菌操作台 ，打開瓶口 ，將舊培養基更換成5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)並置於細胞培養箱中培養 ，根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液或傳代 ，每2至3天加入新鮮培養基（根據細胞密度）;

2. 通過添加新鮮培養基來維持培養 。或者可以通過離心去除舊培養基 ，再加入新培養基並以5-10×10⁵個活細胞/mL的密度再懸浮進行培養 。建議將細胞密度維持在5×10⁵個至1×10⁶個細胞/mL之間 。

保存

凍存條件 ：70%完全培養基+20%FBS+10%DMSO

(備注 ：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100） ，用4度保存的冷凍液直接重懸細胞 ，不能預熱後使用 。)

保存條件 ：液氮存儲

供應限製

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養瓶有破裂 ，培養液有漏液 ：細胞極大可能會汙染 ，所以尊龍凱時會及時安排幫老師解決 。

2.收到細胞後盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基 ，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基 ，請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過 72 小時）

3.細胞漂浮 ：培養瓶不開封 ，瓶口酒精擦拭後平躺放置在培養箱 。1-2小時後觀察 ，如細胞大部分又貼回瓶底 ，表明細胞活力正常 ，剩餘漂浮的細胞可以去掉 ，留8-10ml培養液培養觀察 ，細胞生長至匯合度80% ，進行消化傳代 ；如細胞還是不貼壁 ，將細胞離心收集轉到新培養瓶 ，原培養瓶加部分培養液繼續培養 ，中間注意觀察 ，尊龍凱時的技術人員會一直跟蹤指導 ，直到問題解決 。