一.  細胞特性

細胞名稱 ：A172細胞 ，人膠質母細胞瘤細胞

生長特性 ：貼壁 上皮樣

種      屬 ：人

培養難度：★★

二． 培養條件

培養基 ：90%DMEM+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清 ，貨號:HN-FBS-500）

溫度 ：37℃     氣相 ：95%空氣,5% CO2

三． 傳代方式

1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒 ，將其平躺置於培養箱中進行1-3小時的緩衝 ，.然後置於無菌操作台 ，打開瓶口 ，將其中的培養液去掉 ，再往其中加入5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)並置於細胞培養箱中培養 ，根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代 ，一般2到3天換一次液 ；

2.待細胞長滿瓶底麵積80%-90% ，需要對其進行傳代 ，傳代比例為1:2到1:4 ；

3.傳代步驟 ：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置於37°預熱，倒掉培養瓶中的培養基 ，往培養瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌後棄去 。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶 ，置於37°孵育消化（第一次消化需時常取出置於顯微鏡下觀察 ，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓 、輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間 ，記錄最佳消化時間 ，以便於下次消化） ，消化好後加入3ml完全培養基終止消化 。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞 ，使之完全脫落 ，然後收集細胞懸液 ，1200rpm離心3min ，棄上清 ，加入完全培養基重懸細胞 ，進行傳代 。

四． 凍存條件

凍存條件 ：80%完全培養基+10%FBS+10%DMSO

(*建議使用本公司無血清細胞冷凍液（H-W-100） ，用4度保存的冷凍液重懸細胞 ，直接凍存於-80°C。)

長期存儲 ：液氮

五． 供應限製

該產品僅供研究使用 。

發貨方式

尊龍凱時采取兩種形式的細胞發貨方式 ：

  1. 複蘇發貨

                  a. T25瓶活細胞發貨

                  b. 血清重懸發貨

  2. 凍存管發貨(幹冰發貨)
 對於采取凍存管方式發貨的客戶 ，為了保證可靠性尊龍凱時會多發一管細胞(共2管) ，幹冰覆蓋保溫運輸 。

複蘇及凍存發貨方式均為順豐速運 ，尊龍凱時會根據收貨地址及溫度差異采取不同的發貨方式(T25/血清重懸/凍存/用戶指定) ，並在發貨前的3天內與您確認收貨地址及配送方式 。

尊龍凱時生物論文基金獎勵方法

獎勵對象 ：

使用HAKATA係列產品(HAKATA全係列 ：血清 、凍存液 、試劑 、細胞株等)培養細胞並在中文核心期刊雜誌或SCI期刊雜誌發表文章 ，且文章中材料和方法欄中標注我公司品牌名或公司名(英文 ：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China ，中文:HAKATA或尊龍凱時生物)

該獎勵方案長期有效 ，歡迎大家與尊龍凱時分享獲得成果的喜悅 ！

詳情 ：https://www.ruianjituan.com/index.php?a=shows&catid=38&id=183