當清晨的陽光滿照大地時 ，在細胞培養室的角落 ，倒置顯微鏡旁 ，總會聚集著幾個孩紙 ，時不時的各種感慨 。啊……細胞又長滿了 ！咦……細胞咋飄了好多 ？唉……這個細胞狀態好差 ，能不能長起來 ？完了完了 ，細胞汙染了……

各種細胞 ，總會有各樣問題讓人猝不及防 。

雖說細胞培養是基礎性的技術 ，但並不是每個人都能把每種細胞養的很好呢 ！

今天小編就來說說細胞培養室裏細胞汙染的事兒 。

常見的細胞汙染除了來自其它細胞係的交叉汙染外，包括支原體 、細菌 、真菌汙染 。這些微生物汙染對細胞產生的影響很大呢 ！例如 ，它們會與宿主細胞競爭營養 ；分泌酸性或堿性的副產物 ，使宿主細胞停止生長 ；產生對細胞直接有毒的H2O2等等 。

有同學說 ，我使用了無菌的試劑和耗材 ，也遵循了無菌操作的要求 ，然而……還是莫名汙染了 。隔壁的同學還沒有我做的仔細呢 ！

那麽 ，這種情形下 ，細胞到底為什麽會汙染呢?細胞汙染要怎麽辦呢 ？

小編覺得此同學和彼同學 ，最大的差異恐怕是操作環境了 。給大家提個醒 ，細胞培養室的環境控製尤為重要啦。

有這樣一篇文獻[1],作者對比了正常細胞培養室和汙染培養室 ，在可能汙染的位置放了血培養皿 ，根據微生物的生長狀況，研究細胞汙染的原因 。以下是代表性的培養結果 。

汙染物是毋庸置疑的源頭 ，培養室的空氣 、培養箱內循環的空氣、培養箱的層架以及顯微鏡的載物台和物鏡都可能是汙染源 。

其實 ，特別容易成為汙染源的地方有這麽幾個 ：

1）空調（估計是細胞培養室沒有做層流 ，也不經常清洗） 。

2）生物安全櫃的空氣過濾係統 。

3）生物安全櫃的進風口（如下圖黃線圈出的位置 ，操作不慎的話 ，很容易把培養基或者血清之類的東西滴進這個風口 ，裏麵長個黴什麽的都是正常的 ，因為你不會及時拆開清理） 。

4）顯微鏡（一般也不會有人用84擦顯微鏡吧）

 。

5）培養箱的水盤和複蘇細胞用的水浴鍋（基本上是溫床，但是可以在裏麵加入硫酸銅 ，並且周期性更換來避免長菌 ，但問題是硫酸銅會損傷不鏽鋼） 。

6）離心機（也是重災區）。

7）液氮罐（這個估計大家都不會注意的 ，但好在液氮罐汙染可能性比較低） 。

如果出現細胞汙染的情況 ，勸你直接加入84 ，滅活以後丟棄 。萬一不幸 ，真菌肆虐 ，細胞培養室還要用甲醛熏蒸 。

但是 ，你的細胞特別珍貴，汙染了 ，怎麽辦 ？那就要用抗生素了 ！

1） 、最常用 ：青黴素 、鏈黴素聯合抑製細菌 ，即所謂的“雙抗” ，主要針對革蘭氏陽性菌 、陰性菌 ；對於細菌的感染也可用慶大或卡那黴素 ；

2） 、如果真菌汙染嚴重 ，可用兩性黴素／製黴菌素控製 ；

3） 、若為支原體汙染 ，可用慶大黴素／四環素／紅黴素 ；

注意 ，抑製真菌的抗生素 ，對細胞都有比較大的傷害 。使用前 ，一般都建議先做預實驗 ，估計對細胞本身的影響 。

本次的細胞培養就寫到這裏 。關於細胞培養更多的故事 ，請後續關注~

今天 ，你的細胞還好麽 ？