細胞凍存前應該做哪些準備呢 ?
1.準備適量凍存管 ,做好標記後置於4℃冰箱預冷 ;
2.配製凍存液 :
一般為80%完全培養基+10%FBS+10%DMSO , 需要現配現用
3.程序降溫:
a.按照細胞傳代步驟1-7操作製備細胞懸液並離心
;
b.棄去上清 ,加入適當體積的凍存液 ,用滴管輕輕吹打細胞製成細胞懸液 ;
c.將1 ml細胞懸液加入加入之前已做好標記的凍存管中並做好記錄 ;
d.將凍存管放入梯度凍存盒然後保存至-80℃過夜(可以先在4℃冰箱放置30 min ,然後轉移至-20℃放置1-2 h ,最後轉移至-80℃過夜) ,第二天取出放入液氮罐 ,並記錄好位置信息 。
是不是很繁瑣 ?尊龍凱時來看一下HAKATA無血清細胞凍存液 :
直接從4°C冰箱中取出使用 ,凍存管放於-80°C過夜 ,再轉移至液氮中 。
操作步驟 :
就是這麽簡單直接 ,那麽它的效果怎麽樣呢 ?
尊龍凱時來看一組對比
普通凍存液與HAKATA無血清細胞凍存液細胞複蘇情況
可見 ,使用HAKATA無血清細胞凍存液的細胞複蘇(存活率和活力)更好
HAKATA無血清細胞凍存液 ,通用於各種動物細胞株(腫瘤細胞和常規細胞) ,凍存細胞可在-80°C長期保存(>5年) 。Cell Freezing Medium配方明確 ,不含動物來源性蛋白 ,不含血清 ,可減少各類細菌 、病毒和支原體等汙染 ,保證凍存細胞的安全 。該凍存液含DMSO 、葡萄糖等各種細胞營養成分 ,提高細胞存活率和活力 ,亦適用於無血清培養細胞和蛋白表達細胞 。
普通凍存液 | HAKATA無血清細胞凍存液 | |
配置 | 需要現配 ,配方麻煩 | 取出即用 |
凍存方式 | 程序降溫 ,繁瑣耗時 | 無需程序降溫 ,直凍-80°C |
適用性 | 一般培養細胞 | 適合無血清培養細胞和蛋白表達細胞 |
安全性 | 無法把控 | 配方明確 ,不含動物來源性蛋白 |
存活率 | 凍存後複蘇率低 | 細胞(存活率和活力)高達90%-98% ,批次差異小 |
那麽 ,你會選擇哪種凍存液呢 ?
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