胎牛血清 、小牛血清 、新生牛血清之間的區別
1 、采血時間不同
胎牛血清(Fetal Bovine Serum)是在母牛懷孕5-8個月時 ,通過胎牛心髒穿刺采血獲取的血清 。新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生後2周內的新生牛靜脈取血 。小牛血清(Calf Serum)采自出生後2周至1年內的小牛靜脈取血 。
2 、組份與比例不同
兩者所含的促細胞生長因子 、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同 。胎牛血清尤其含有胚胎發育所必需的生長因子 。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了 。
3 、用途與用法不同
某些細胞必需胎牛血清才能生長 ,而有些細胞隻需小牛血清即可 。使用濃度一般在5%-10% ,有特殊要求的濃度在20% 。血清保存和使用須注意 :血清應保存在-5℃至-20℃ 。解凍血清時 ,推薦尊龍凱時總結出來的三步法(見下表) ,可預防沉澱發生 。不推薦血清4℃過夜融化 ,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中 。因為血清在融化時 ,蛋白先融 ,冰塊後融 ,局部蛋白濃度過高,易發生沉澱 。血清在解凍後 ,應按用量分裝並於-20℃保存 ,避免反複凍融 。
溫度 100ml血清 500ml血清
第一步 室溫 35分鍾 90分鍾
或15-20℃水浴 5分鍾 18分鍾
第二步 20℃水浴 15分鍾 25分鍾
第三步 37℃水浴 20分鍾 35分鍾
注意 :在水浴過程中 ,血清的液麵要完全浸在水中 。在融化過程中要慢慢搖動 ,使血清混勻 ,但不要產生泡沫!