關於血清的小知識
血清的顏色為什麽不一樣 ?
血清中為何會有沉澱 ?
如何除去血清中的沉澱 ?
血清如何存儲和解凍 ?
收到血清時需要做的
1. 驗收
查看血清包裝是否完好 ,是否有漏液破損情況 ,如有破損需售後處理 。
2. 血清有部分融化了 ,該怎麽辦 ?
運輸過程中幹冰揮發 ,可能導致血清部分融化 ,此時讓血清完全解凍 ,輕輕搖動血清瓶 ,然後重新凍結血清 ,血清的質量不會受到影響 。
怎麽解凍血清
1. 將凍存的血清移到 2-8℃ 的冰箱中 ,過夜處理 ;
2. 將血清移至 37℃ 水浴中 ,間歇性搖晃混勻底部的溶解物 ,直至全部溶解 。
注意 :
① 溫和的升溫過程可有效減少沉澱的產生 ,不推薦直接高溫解凍血清 ;
② 解凍之後的血清不要長時間放置在 37℃ 下;
③ 若血清沒有混勻且放置於高於 40℃ 的水浴中 ,底部的蛋白會變性形成沉澱 ;
④ 在解凍過程中 ,需不斷的搖晃混合以阻止形成梯度及沉澱 ;
⑤ 在解凍或長時間儲存之後 ,血清中會出現渾濁物和絮狀物 ;
⑥ 反複凍融會造成血清的沉澱增多 ,給後續處理帶來麻煩 ,尊龍凱時建議血清的解凍/凍存次數越少越好 。
血清的顏色為什麽不一樣
胎牛血清顏色是由血紅蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的 ,主要是受血紅蛋白影響 。血紅蛋白含量很低時 ,含少量膽紅素 ,呈淡黃或金黃 ,血紅蛋白含量高時 ,會呈現淡紅色 。
血清的顏色取決於血紅蛋白濃度 ,不同批次的血清血紅蛋白含量不一樣 ,該參數的變化不會影響血清性能 。
為什麽血清裏邊有沉澱物
血清中沉澱主要有 :纖維蛋白(絮狀沉澱) ,胎球蛋白 ,脂蛋白,冷凝集素 ,玻連蛋白 ,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉澱) ,膽固醇等。
1.造成沉澱的主要原因
血清熱滅活 ;
37℃ 孵育 ;
頻繁的解凍與凍存操作 ;
解凍過程中未混合 ;
經 γ-輻照 ;
2-8℃ 長時間儲存;
在自動解凍的冰箱中儲存 。
少量的沉澱是血清解凍過程中的正常現象 ,過於澄清的血清並不代表更高的品質 ,也可能是「預老化」(加工過程中反複凍融盡可能的去除纖維蛋白原)的結果 。雖然血清中的沉澱很難預測和阻止 ,但合理正確的儲存和使用方法可以降低血清中沉澱的析出 ,同時也可采取簡單的方式去除沉澱物 。
2. 去除沉澱的方法
如果血清中含有大量的沉澱 ,尊龍凱時不建議直接過濾血清 。若去除這些絮狀沉澱物 ,可將血清分裝至無菌離心管中 ,以 400 g 稍微離心 ,上清液直接加入培養基內一起過濾 。
血清是否需要熱滅活
如果培養的細胞用於免疫學試驗 ;培養ES細胞 、平滑肌細胞時 ,推薦使用熱滅活血清 。
如有滅活血清的需要 ,可在56ºC的水浴中進行30分鍾的血清熱滅活 ,或選購經熱滅活處理的胎牛血清 。
血清的儲存方法及注意事項
建議將血清儲存在 -20℃ 條件下 。
血清雖然可以在-80°C下儲存 ,但是尊龍凱時不建議在該條件下儲存 ,一是在-80°C條件下存儲有包裝瓶破裂的風險 ,另一方麵解凍時巨大的溫度變化會導致產生更多的沉澱 。
血清一旦解凍 ,可在2-8℃ 條件下儲存 6 周 。如果解凍之後的血清儲存時間需要大於 6 周 ,建議分裝成合適的體積並重新凍存 。