養細胞的生長和增殖過程
    體內細胞生長在動態平衡環境中 ，而組織培養細胞的生存環境是培養瓶 、皿或其它容器 ，生存空間和營養是有限的 。當細胞增殖達到一定密度後 ，則需要分離出一部分細胞和更新營養液 ，否則將影響細胞的繼續生存 ，這一過程叫傳代（Passage或Subculture） 。每次傳代以後 ，細胞的生長和增殖過程都會受一定的影響 。另外 ，很多細胞特別是正常細胞 ，在體外的生存也不是無限的 ，存在著一個發展過程 。所有這一切 ，使組織細胞在培養中有著一係列與體內不同的生存特點 。
    （一）培養細胞生命期（Life Span of Culture Cells）
    所謂培養細胞生命期 ，是指細胞在培養中持續增殖和生長的時間 。體內組織細胞的生存期與完整機體的死亡衰老基本相一致 。組織和細胞在培養中生命期如何 ？這要看細胞的種類 、性狀和原供體的年齡等情況 。人胚二倍體成纖維細胞培養 ，在不凍存和反複傳代條件下 ，可傳30～50代 ，相當於150～300個細胞增殖周期 ，能維待一年左右的生存時間 ，最後衰老凋亡（Apoptosis） 。如供體為成體或衰老個體 ，則生存時間較短 ；如培養的為其它細胞如肝細胞或腎細胞，生存時間更短 ，僅能傳幾代或十幾代 。隻有當細胞發生遺傳性改變 ，如獲永生性或惡性轉化時 ，細胞的生存期才可能發生改變 。對此以後將詳述 。
  正常細胞培養時 ，不論細胞的種類和供體的年齡如何 ，在細胞全生存過程中 ，大致都經曆以下三個階段 ：
    1．原代培養（Primary Culture）期 ：
    也稱初代培養 ，即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段 ，一般持續1一4周 。此期細胞呈活躍的移動 ，可見細胞分裂 ，但不旺盛。初代培養細胞與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大 。細胞群是異質的（Heterogeneous） ，也即各細胞的遺傳性狀互不相同 ，細胞相互依存性強 。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞 ，在軟瓊脂培養基中進行培養時 ，細胞克隆形成率（Cloning Efficiency）很低 ，即細胞獨立生存性差 。克隆形成率即細胞群被稀釋分散成單個細胞進行培養時 ，形成細胞小群（克隆）的百分數 。初代培養細胞多呈二倍體核型 ；由於原代培養細胞和體內細胞性狀相似性大 ，是檢測藥物很好的實驗對象 。
    2．傳代期 ：
    初代培養細胞一經傳代後便改稱做細胞係（Cell Line） 。在全生命期中此期的持續時間最長 。在培養條件較好情況下 ，細胞增殖旺盛 ，並能維持二倍體核型 ，呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞係（Diploid Cell Line） 。為保持二倍體細胞性質 ，細胞應在初代培養期或傳代後早期凍存 。當前世界上常用細胞均在不出十代內凍存 。如不凍存 ，則需反複傳代以維持細胞的適宜密度 ，以利於生存 。但這樣就有可能導致細胞失掉二倍體性質或發生轉化 。一般情況下當傳代10～50次左右，細胞增殖逐漸緩慢，以至完全停止 ，細胞進入第三期 。
    3．衰退期 ：
    此期細胞仍然生存 ，但增殖很慢或不增殖 ；細胞形態輪廓增強 ，最後衰退凋亡 。在細胞生命期階段 ，少數情況下 ，在以上三期任何一點（多發生在傳代末或衰退期） ，由於某種因素的影響 ，細胞可能發生自發轉化（Spontaneous Transformation） 。轉化的標誌之一是細胞可能獲得永生性（Immortality）或惡性性（Malignancy） 。細胞永生性也稱不死性 ，即細胞獲持久性增殖能力 ，這樣的細胞群體稱無限細胞係（Infinite Cell Line） ，也稱連續細胞係（Continuous Cell Line） 。在早期文獻中無限細胞係也稱已建立細胞係（Established Cell Line） ，現已不用 。無限細胞係的形成主要發生在第二期末 ，或第三期初階段 。細胞獲不死性後 ，核型大多變成異倍體（Heteroploid） 。細胞轉化亦可用人工方法誘發 ，轉化後的細胞也可能具有惡性性質 。細胞永生性和惡性性非同一性狀 。