Q:細胞增殖實驗(細胞毒性實驗)中
,
細胞鋪板數量是以什麽為標準來定
?之前感覺是以檢測當日細胞覆蓋96孔孔底80~100%為宜
。現在似乎感覺有點問題
。迷茫中……貼壁細胞是絕對不能超過1萬個每孔嗎
?有的細胞個頭特別的小
,鋪下去72小時候後看著很少
。還有些細胞特別的慢
,72小時候也是很少
。我用Alarm blue方法檢測
,經常 無藥的空白對照孔的熒光強度比給藥(低濃度)的還要低
。而且中間還經常跳動
,有的超出趨勢(按照趨勢應該有的強度)的高或者低
。
A:消化每瓶細胞 ,如重懸體積為8ml ,你可以計數每ml的量 ,假如5*10^5個/ml ,那麽一瓶就是4*10^6個細胞 ,鋪96孔板時就可以換算成長滿一個孔的量 ,即4*10^6/25(瓶子底麵積)*0.32(96孔板每孔麵積) ,做MTT實驗需要72h ,再按照倍增時間 ,如24h,再換算成你種板時候的量 ,要除以2^3 。不知道這樣表述明白了麽