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RAW264.7細胞狀態不好 ,是培養基的問題嗎 ?

Q:RAW264.7細胞用的是DMEM高糖培養基 ,培養的細胞不是很好 ,是培養基的問題嗎 ?

該細胞我用的是DMEM高糖培養基 ,10%FBS,1%P/S 。培養情況不是很好 ,細胞膜向外生出很多角 ,希望培養過此細胞的人可以一起交流 。另外 ,此細胞貼壁很緊 ,不知各位用胰酶消化幾分鍾 ?

 

A:RAW264.7細胞為小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
培養基:90% DMEM  +10% FBS
消化條件: 預冷PBS浸泡5-10Min
細胞正常形態為圓形,貼壁生長,生長速度較快,細胞難消化,消化時用預冷的PBS淋洗,然後浸泡5min,讓後用槍輕輕吹起吹散收集離心,這個過程很關鍵,如果沒有消化到位就吹打或消化過久,細胞次日貼壁就會分化,分化之後的形態是細胞兩端長出尖尖的觸角,細胞不再圓形貼壁,而是平鋪向四周擴散生長 。
所以你換培養基試試看 ,我養的挺好的!

RAW264.7細胞

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