怎樣才能避免3T3L1前脂肪細胞分化過程中的細胞漂浮 ？

Q:在做3T3L1前脂肪細胞分化過程中 ，當加了IBMX(0.5mM)+胰島素(10ug/ml)+地塞米鬆(0.25uM/L)後 ，細胞分化的比較好 ，

在加分化液後的第4天就開始出現脂滴 ，在第8天後有90%以上的細胞中出現明顯的脂滴 ，

但是從加分化液後的第2天起 ，培養液中就開始出現大量的懸浮細胞 ，每次換液時這些懸浮的細胞就丟失了 ，

到第8天後培養瓶中貼壁的細胞很少啦 ，如何才能避免這些細胞的懸浮啊 ！是所加分化液濃度問題（如胰島素濃度）還是其它原因啊 ？

A:細胞的來源一定要好 。3T3L1細胞株容易蛻化 ，一旦發現細胞的形態不好一定要換新的細胞株 ，

最好一年從atcc購買至少一次 ，細胞的好壞是決定後麵 ，分化 、漂浮等等一切的關鍵 ，本人的細胞都是從atcc購買 。

1 ：8傳代後三天即可長到80%以再次傳代 ，傳代後4天細胞可以融合 ，再讓其融合兩天後即可以分化 ，時間過久細胞會漂浮或層疊

 ，不利於分化 ；沒有融合的過程 ，細胞沒有退出快速生長期也不利於分化 ；分化之前可以將細胞用hank‘s液輕輕洗一下 ，洗去漂浮的細胞 ，

然後再加分化液 ；已經開始分化的細胞每次換液時候小心 ，不要去振蕩或搖晃瓶子 ，可以將瓶子豎立起來 ，將培養液加在瓶子上沒有貼細胞的一麵 ，

這樣不會將細胞吹打起來 ；細胞分化過程中換液要及時 ，按兩天一次換液 ，分化後第8天有90%以上的細胞中有脂滴 ，要及時使用 ，

不然時間稍長分化好的細胞就漂浮起來啦 ！再想讓它貼壁就困難啦 ！