依我個人經驗來說 ，Hela細胞還是比較好養的細胞 。

生長特性為貼壁 ，上皮樣

我培養hela細胞所用的培養基為 ：90%DMEM（L）+10%FBS(推薦使用HAKATA胎牛血清)

溫度 ：37℃     氣相 ：95%空氣 ，5%二氧化碳

傳代步驟 ：

1. 首先用75%酒精對培養瓶進行消毒 ，令培養瓶平置於培養箱中進行1-3小時的緩衝 。

然後放置於超淨操作台 ，打開培養瓶瓶口 ，將其中的培養液去掉 ，再往其中加入5-6ml新鮮培養基(以T25培養瓶為例)並置於細胞培養箱中培養 。

根據細胞的生長狀況以及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代 ，換液時間一般為2到3天換一次 。

2. 等到細胞長滿瓶底麵積的80%-90% ，需要對其進行傳代 ，傳代比例為1:3到1:8 ；

3. 傳代步驟 ：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置於37°預熱 ，並倒掉培養瓶中的培養基 ，網培養瓶加入中3-5mlPBS ，輕輕搖晃洗滌後棄去 。

4.    在培養瓶中加入1-2-ml預熱好的胰酶 ，置於37°C孵育消化 。(第一次消化需時常取出置於顯微鏡下觀察 ，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓 、輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間 ，記錄最佳消化時間 ，以便於下次消化） ，消化好後加入3ml完全培養基終止消化 。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞 ，使之完全脫落 ，然後收集細胞懸液 ，1200rpm離心3min ，棄上清 ，加入完全培養基重新懸浮細胞 ，進行傳代 。

細胞保存 ：

1. 凍存配置 ：80%完全培養基 + 10%FBS +10%DMSO

2. 我使用的是 ：HAKATA無血清細胞凍存液 ，從4度冰箱拿出，直接重懸細胞 ，之後直凍-80°C冰箱 ，無需梯度降溫 ，無需配置凍存液 。