細胞凍存液配方 :
用於冷凍保存細胞的培養基應始終與用於通過添加胎牛血清(FBS)(無血清培養物的情況下)或FBS濃度增加來繁殖細胞的製劑相同 ,但是最終濃度不超過20% 。
如果在冷凍或解凍過程中裂解一些細胞 ,FBS將傾向於結合可能釋放的有毒物質 。還必須使用細胞凍存液 。
可以使用兩個(2)中的任何一個 。主要選擇是無菌二甲基亞碸(DMSO) ,終濃度為7%-10% ,在大多數情況下10%是最佳的 。
另一種選擇是無菌甘油 ,在培養基中終濃度為10% 。如果冷凍保存的細胞類型可能因暴露於強雙極化合物如DMSO而受到不利或不良影響 ,則應使用甘油 。
其實例是HL-60細胞 ,其在暴露於DMSO時可以分化 。
如果這將引起關注或可能對隨後的培養產生負麵影響,甘油將是優選的細胞凍存液 。
重要提示 :細胞凍存液 ,尤其是DMSO ,每次都必須新鮮使用 。
不要購買大量產品並繼續打開和關閉試劑瓶 。兩種細胞凍存液都會從空氣中快速氧化/或吸收潛在有毒物質 。
冷凍保存培養基每次應僅以當天所需的體積製成 。
它可以在+ 4°C保持長達一周 ,通常沒有問題 。然而 ,非常敏感的培養物 ,特別是在無血清培養基中繁殖的培養物可能需要非常新鮮 、純淨的冷凍保存培養基 。