牛血清白蛋白(BSA) ,是牛血清中的一種球蛋白 ,包含607個氨基酸殘基 ,分子量為66.446KDa ,等電點為4.7 。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用 。
主要成分
:
1.蛋白質——是牛血清中主要成份
。除包括可攜帶金屬離子
、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白
,球蛋白
。
2.多肽——血小板促生長因子能促細胞分裂
,是多肽家庭的主要成員之一
,是主要的促細胞增殖因子
;成纖維細胞生長因子
、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等
,血清中含量雖很少
,但對細胞生長也有一定作用
。
3.激素——胰島素
:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸
,與促細胞分裂有關
;類胰島素生長因子
:能與細胞表達的胰島素受體結合
,從而有胰島素同樣的作用
;促生長激素
:促細胞增殖效應
。
4.其他成份——氨基酸
、葡萄糖、酮酸等對多種營養成分的合成培養基意義不大
。與蛋白相結合狀態的微量元素對細胞培養有意義。
結構與作用
:
牛血清中的簡單蛋白
,是血液的主要成分(38g/1000ml)
,分子量68kD
。等電點4.8
。含氮量16%
,含糖量0.08%
。僅含己糖和己糖胺
,含脂量隻有0.2%
。白蛋白由581個氨基酸殘基組成
,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵
,在肽鏈的第34位有一自由巰基
。白蛋白可與多種陽離子
、陰離子和其他小分子物質結合
。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用
、PH緩衝作用
、載體作用和營養作用
。在動物細胞無血清培養中
,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用
。牛血清白蛋白(BSA)
,又稱第五組分
,是牛血清中的一種球蛋白
,包含583個氨基酸殘基
,分子量為66.430 Da
,等電點為4.7
。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在wesern blot中作為Blocking agent
。
BSA一般做為穩定劑被用於限製酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中
,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低
。加入BSA後
,它可能起到“保護”或“載體”作用
,不少酶類添加 BSA後能使其活性大幅度提高
。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什麽影響
。對多數底物DNA而言
,BSA可以使酶切更完全,並可實現重複切割
。在37℃
,酶切反應超過1h時
,BSA可以使酶更加穩定
,因為在不含BSA的反應緩衝液中
,許多限製性內切酶在37℃下隻能存活10"20min甚至更短的時間
。而BSA可以結合緩衝液或底物DNA中抑製限製性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質
。
牛血清白蛋白(BSA)的用途如下
:
1
、用於生化研究
、遺傳工程和醫藥研究
2
、用作醫藥保健食品
、調味品
3
、維持滲透壓
、pH緩衝、載體作用
4
、在PCR體係中有助於Taq酶的穩定性及活性
,可以提高PCR的效率
應用
:
牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應用, 例如在WB實驗中加入BSA, 通過提高溶液中蛋白質的濃度
,對酶起保護作用
。防止酶的分解和非特異性吸附
,能減輕有些酶的變性
,減輕不利環境因素如加熱
,表麵張力及化學因素引起的變性的
。