胎牛血清通常在細胞培養中作為基礎生長培養基的添加劑 ，在細胞培養中 ，血清供應了豐富的高分子蛋白 ，低分子量營養物 ，疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子 。同時 ，胎牛血清可以增加培養基的緩衝能力或中和有毒成分 ，起到保護細胞的作用 。在細胞培養過程中是否選擇添加血清 ，主要根據基礎培養基化學成分 ，培養細胞的類型和培養體係而定 。今天給大家分享的是牛血清實驗中常見的問題解析 ！搬起小板凳快來圍觀吧 ！

血清實驗中常見的問題解析 ：

一、 如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損 ？

將血清從冷凍箱取出後 ，先置於2～8℃冰箱使之融解 ，然後在室溫下使之全融 。但必須注意的是 ，融解過程中必須規則地搖晃均勻 。

長時間儲存在2-8℃時 ，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素 、纖維蛋白原 、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉澱或可見的混濁 。因此 ，推薦在-20℃以下儲存血清 ，並避免反複凍融 。

建議血清應保存在-2O℃ 。若存放於4℃時 ，請勿超過一個月 。若一次無法用完一瓶 ，建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內 ，再放回冷凍 。

二、血清中包含絮狀沉澱 ，它們是什麽 ，怎麽處理 ？

沉澱包含纖維蛋白和脂蛋白 。這是正常特性 ，不會影響產品性質 。要除去沉澱 ，離心血清(400g ，1-2分鍾)或者簡單的讓其沉澱在瓶子底部 ，將血清小心的轉移到另一個無菌瓶裏(一般不建議采用過濾的方法除去沉澱 ，因為沉澱會堵塞濾膜而無法過濾) 。大多情況輕輕搖動沉澱並加熱至37℃就會再溶解 。所以 ，使用產品時要搖動並加熱血清至37℃ ，沉澱會自然消失 。

三 、 培養基中添加了血清和抗生素後 ，可長期保存嗎 ？

一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時 ，您應該在兩到三周內使用它 。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍後就開始降解。

四 、 為什麽要熱滅活血清 ？

加熱可以滅活補體係統 。激活的補體參與溶解細胞事件 ，刺激平滑肌收縮 ，細胞和血小板釋放組胺 ，激活淋巴細胞和巨噬細胞 。在免疫學 研究 ，培養ES細胞、平滑肌細胞時 ，推薦使用熱滅活血清 。

五 、 有必要做熱滅活嗎？

實驗顯示 ，經過正確處理的熱滅活血清 ，對大多數的細胞而言是不需要的 。經此處理過的血清對細胞的生長隻有微小的促進 ，或完全沒有任何作用 ，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量 ，而造成細胞生長速率的降低 。

而經過熱處理的血清 ，沉澱物的形成會顯著的增多 ，這些沉澱物在倒置顯微鏡下觀察 ，像是“小黑點” ，常常會讓研究者誤以為是血清遭受汙染 ，而把血清放在37℃環境中 ，又會使此沉澱物更增多 ，使研究者誤認為是微生物 的分裂擴增 。

非必須 ，可以不需要做熱處理這一步 。不但節省時間 ，更確保血清的質量!

六 、細胞培養 中出現黑點是汙染嗎 ？如何處理 ？

一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成 ，首先 ，要肉眼觀察培養基是否混濁 ，然後 ，在鏡下觀察培養細胞生長的狀態 ，黑點是否遊動 。如果細胞被汙染 ，微生物則會大量繁殖 ，培養基就會迅速變黃 、變混濁 。汙染包括細菌汙染 、支原體汙染等。

七 、小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項 ？

來源不同 ：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心髒穿刺采血獲取的胎牛的血清 ，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛 。

組份與比例不同 ：兩者所含的促細胞生長因子 、促貼附因子 、激素及其他活性物質等組份與比例不同 ，用途與用法不同 ：某些細胞必需胎牛血清才能生長 ，而有些細胞隻需小牛血清即可 ，使用濃度不同 ，一般在5%-10% ，有特殊要求的濃度在20% 。

血清保存和使用須注意 ：血清應保存在-5℃至-20℃ ，若存放在4℃不可超過一個月 。

解凍血清時  ，應先將血清至於2-8℃冰箱 ，並經常搖勻使之溶解 ，然後至室溫放置使之升溫 ，絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中 ，如放在37℃解凍 ，顏色加深 ，粘稠度也會增加 ，血清在解凍和熱滅活後，應按用量分裝並於-20℃保存 ，避免反複凍融 。