牛血清是細胞培養中用量大的天然培養基
,含有豐富的細胞生長必須的營養成份
,常用於動物細胞的體外培養
,具有極為重要的功能
。
一
、血清的成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很複雜的混合物
,其組成成份雖大部分已知
,但還有一部分尚不清楚
,且血清組成及含量常隨供血動物的性別
、年齡
、生理條件和營養條件不同而異
。血清中含有各種血漿蛋白
、多肽
、脂肪
、碳水化合物
、生長因子
、激素
、無機物等
,這些物質對促進細胞生長或抑製生長活性是達到生理平衡的
。
二
、血清的功能
1.提供對維持細胞指數生長的激素
,基礎培養基中沒有或量很少的營養物
,以及主要的低分子營養物
。
2. 提供結合蛋白
,能識別維生素
、脂類
、金屬和其他激素等
,能結合或調變它們所結合的物質活力
。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用
。
4.是細胞貼壁
、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源
。
5.起酸堿度緩衝液作用
。
6.提供蛋白酶抑製劑
,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活
,保護細胞不受傷害
。
三
、不同血清之間的差異
市場上各種血清產品角龍混珠
,一不小心,你可能就使用了品質不好的血清
。血清按照采血時間可分為胎牛血清
,新生牛血清和小牛血清
,三者的優劣順序為:胎牛,血清>新生牛血清>小牛血清
。
一般細胞建議使用胎牛血清培養
,部分細胞可使用新生牛血清培養
,小牛血清則不建議用於細胞培養
。
四
、血清選購的注意事項
1.產品關鍵指標
(1)低內毒素
內毒素是所有細胞培養的大敵,對細胞培養的影響性早在將近三十年前就被廣泛討論和重視.
。內毒素會改變細胞外形
,影響下遊生物途徑反應
,抑製酵素活性等
,低內毒素對細胞培養作用重大
。
(2)血紅蛋白
根據血紅蛋白含量的不同表現出黃色
、淡黃色
、橘紅色
、微紅色等
。細胞培養用血清的標準是血紅蛋白含量不高於20mgldL
,顏色越紅
,數值越高;反之
,數值越低
。品質好的一般呈琥珀色
,偏紅一般生產工藝較差
(3)微生物指標
包括細菌
、黴菌
、支原體
、噬菌體
、各類病原性病毒等
2.細胞增殖能力
每個產品針對的細胞不一樣
,產品出廠前都會經過細胞實驗驗證
,Corning的幾款血清都是經過四種細胞檢測
,並且通過多種病毒檢測
。Bovogen是澳洲本土血清品牌
,位於澳大利亞墨爾本
,要知道澳大利亞和新西蘭是世界上血源等級很好的地方
,尤其是新西蘭
,是世界上潔淨的牛血清源地
。
3.產品批次
因為血清來源於動物
,其組成成分有1000種左右
,每個批號的組分和組分含量都是不固定的
,因此批間差異是可能存在的
。