原代細胞如何取材 ,這些你都會嗎 ? - 生物行業前沿動態Forward trend - 細胞凍存液|胎牛血清|細胞株|細胞培養基|ELISA試劑盒|ECL發光液|國產血清|澳洲血清|完全培養基-上海尊龍凱時生物科技有限公司

申請試用裝
您當前的位置 :首頁 > 最新動態 > 前沿動態
原代細胞如何取材 ,這些你都會嗎 ?

一 、取材的基本要求
1.取材要注意新鮮和保鮮
2.應嚴格無菌
3.防止機械損傷
4.去除無用組織和避免幹燥
5.應注意組織類型 、分化程度 、年齡等
6.作好記錄

二 、各類組織的取材技術
皮膚和粘膜的取材
內髒和實體瘤的取材
血液細胞的取材
骨髓 、羊水 、胸/腹水細胞取材
動物組織取材
人胚體組織取材
雞(鴨)鳥類胚胎組織取材

皮膚和粘膜的取材
主要取自於手術過程中的皮片 ,方法似外科取斷層皮片手術操作 ,但麵積一般2~4c㎡ 。

內髒和實體瘤的取材
內髒除消化道外基本是無菌的 ,但取材時要明確和熟悉所需組織的類型和部位 ,實體瘤取材時要取腫瘤細胞豐富的區域 ,要避開破潰 、壞死液化部分 ,以防汙染 ,盡量去除混雜的結締組織 。

血液細胞的取材
血細胞 、淋巴細胞的取材 ,一般多抽取靜脈外周血 ,或從淋巴組織中(如脾 、扁桃體 、胸腺 、淋巴結等)分離細胞 ,取材時應注意抗凝 。

骨髓 、羊水 、胸/腹水細胞取材
嚴格無菌 ,注意抗凝 ,還要盡快分離培養 ,離心後 ,用無鈣 、鎂PBS洗兩次 ,再用培養液洗一次後即可培養 ,不宜低溫存放 。

動物組織取材
鼠胚組織取材
首先用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動物 ,然後將其整個浸泡在含有75%酒精的燒杯中 ,5min後(注意時間不能太長,以避免酒精從口或其他通道進入體內 ,影響組織活力) ,取出動物 ,在消毒過的木板上可用無菌的圖釘或大頭針固定四肢 ,切開皮膚 ,用無菌操作法解剖取胚或用無菌止血鉗挾起皮膚 、用無菌眼科剪沿軀幹中部環形剪開皮膚 ,用止血鉗分別挾住兩側皮膚拉向頭尾 ,把動物反包 ,暴露軀幹 ,然後再固定 ,更換無菌解剖器材 ,采用無菌操作法解剖取出胚胎 。

幼鼠胚腎(或肺)取材
幼鼠采用上述方法處死消毒後 ,腹部朝上固定在木板上 ,先切開遊離毛皮並拉開至兩側 :然後采用無菌法打開胸腔取肺 ,或背部朝上固定在木板上 ,先將背部毛皮切開遊離並拉向兩側 ,然後采用無菌法從背部打開腹腔取腎 。

人胚體組織取材
取材方法與鼠類相同
雞(鴨)鳥類胚胎組織取材步驟
(1)取孵化至適當胚齡(9~12天)的胚蛋 ,用照蛋燈在暗處燈檢 ,若有豐富血管 、胚體有運動的胚蛋 ,說明胚體發育良好 ,並用有色筆劃出氣室和胚體位置 。
(2)將胚蛋置於蛋架上 ,先用溫水清洗蛋殼 ,再用75%酒精棉球擦幹 ;
(3)經碘酒 、75%酒精消毒後 ,在無菌條件下采用無菌法用剪刀或中號鑷子打開氣室 ,沿氣室邊緣去除蛋殼 ;
(4)用眼科鑷撕去殼膜 ,暴露出雞胚 ;
(5)用彎頭鑷輕挑起胚頭 ,取出胚胎 ,放入無菌平皿中 ,解剖取材 。

公司簡介 / Company profile
上海尊龍凱時生物科技有限公司
Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
       公司主要依托複旦大學 、同濟大學等上海地區多家著名高校 ,擁有一支富有經驗的開發團隊 ,專業從事細胞及細胞...
聯係尊龍凱時 / Contact
電 話 :021-69950217  173-2144-0983
傳 真 :021-69950218
郵 箱 :2078251929@qq.com
郵 編 :201800
地 址 :上海市嘉定區翔江公路518號寅尚產業園D座210室
Copyright © 2018 CHUANQIU Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved. 滬ICP備18030131號-1
  • 申請試用裝
  • 021-69950217