實驗人員的無菌準備
:
1.肥皂洗手
。
2.穿好隔離衣
、帶好隔離帽
、口罩
、放好拖鞋
3.用75%酒精棉球擦淨雙手
。
無菌操作的演示
:
1.凡是帶入超淨工作台內的酒精
、PBS
、培養基
、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表麵
2.靠近酒精燈火焰操作
。
3.器皿使用前必須過火滅菌
4.繼續使用的器皿(如瓶蓋
、滴管)要放在高處
,使用時仍要過火
。
5.各種操作要靠近酒精燈
,動作要輕
、準確
,不能亂碰
。如吸管不能碰到廢液缸。
6.吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管
,防止交叉汙染
。
準備室的設備
:
單蒸餾水蒸餾器
、雙蒸餾水蒸餾器
、酸缸
、烤箱
、高壓鍋
、儲品櫃(放置未消毒物品)
、儲品規(放置消毒過的物品)
、包裝台
。配液室的設備
:扭力天平和電子天平(稱量藥品)
、PH計(測量培養用液PH值)
、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)
。
培養室的設備
:
液氮罐
、儲品櫃(存放雜物)
、日光燈和紫外燈
、空氣淨化器係統
、低溫冰箱(-80℃)
、空調
、二氧化碳缸瓶、邊台(書寫實驗記錄)
。必須放在無菌間的設備
:離心機(收集細胞)
、超淨工作台
、倒置顯微鏡
、CO2孵箱(孵育培養物)
、水浴鍋
、三氧消毒殺菌機
、4℃冰箱(放置serum和培養用液)
。
無菌室的滅菌
:
1.定期打掃無菌室
:每周打掃一次
,先用自來水拖地
、擦桌子
、超淨工作台等
,然後用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%過氧乙酸擦拭
。
2.CO2孵箱(培養箱)滅菌
:先用3‰新潔爾滅擦拭
,然後用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸
,再用紫外燈照射
3.實驗前滅菌
:打開紫外燈
、三氧殺菌機
、空氣淨化器係統各20-30分鍾
4.實驗後滅菌
:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超淨台
、邊台
、倒置顯微鏡的載物台
。