2.細胞活化後 ,約需數日 ,或繼代一至二代 ,其細胞生長或特性表現才會恢複正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質) 。2y2Q O6\#o&h4@+z,~3.材料37℃ 恒溫水 ,新鮮培養基 ,無菌吸管/離心管/培養瓶 ,液氮或幹冰容4.步驟 :4.1操作人員應戴防護麵罩及手套 ,防止冷凍管可能爆裂之傷害 。4.2自液氮或幹冰容器中取出冷凍管 ,檢查蓋子是否旋緊 ,由於熱脹冷縮過程 ,此時蓋子易鬆掉 。4.3將新鮮培養基置於37°C水槽中回溫,回溫後噴以70%酒精並擦拭之 ,移入無菌操作台內 。4.4取出冷凍管 ,立即放入37°C水槽中快速解凍 ,輕搖冷凍管使其在1分鍾內全部融化以70%ethanol擦拭保存管外部 ,移入無菌操作台內 。4.5取出0.9ml解凍之細胞懸浮液 ,緩緩加入有培養基之培養容器內(稀釋比例1:10~1:15)混合均勻 ,放入CO2培養箱培養 。另取0.1ml解凍細胞懸浮液作存活測試 。4.6解凍後是否立即去除冷凍保護劑(例如DMSO或glycerol) ,依細胞種類而異 ,一般而言大都不需要立即去除冷凍保護劑 。惟若要立即去除 ,則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10ml培養基之離心管內 ,離心1,000rpm,5分鍾 ,移去上清液 ,加入新鮮培養基 ,混合均勻 ,放入CO2培養箱培養 。4.7若不需立即去除冷凍保存劑 ,則在解凍培養後隔日更換培養基 。