2.材料 ：2.1.胰酶溶液(0.05%胰酶) ： 以10ml分裝於15ml無菌離心管中 ，保存於20℃ ，使用前放在37℃ 水槽回溫 。2.3.新鮮培養基2.4.無菌吸管/離心管/培養瓶生3.步驟 ：3.1.附著型細胞(adherentcell)3.1.1.吸掉舊培養液 。3.1.2.用D-PBS洗滌細胞一至二次 。3.1.3.加入胰酶溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2) ，37℃作用數分鍾 ，於倒立顯微鏡下觀察 ，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時 ，吸掉或者傾倒胰酶溶液 。(若沒有完全去除 ，則在胰酶作用後 ，加入適量含血清之新鮮培養基終止胰酶作用)3.1.4.輕拍培養瓶使細胞自瓶壁脫落 ，加入適量之新鮮培養基 ，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊 ，混和均勻後 ，依稀釋比例轉移至新的培養瓶中 ，以正常培養條件培養 。3.2.懸浮型細胞(suspensioncell)3.2.1.吸出細胞培養液 ，放入離心管中 ，離心1000rpm5-10分鍾 。3.2.2.吸掉上清液 ，加入適量之新鮮培養基 ，混和均勻後 ，依稀釋比例轉移至新的培養瓶中 ，以正常培養條件培養 。3.3.雜交瘤細胞有些雜交瘤需培養三天以上才會產生抗體 ，若是更換培養基，則可能會失去抗體 。因此繼代培養不需離心後更換培養基 ，直接添加新鮮培養基稀釋細胞濃度即可 。若體積太大 ，可傾斜放置 ，或分至新培養瓶中 。
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