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使用血清的小技巧
1.血清必須貯存於–20~ -70℃ ,若存放於4℃ ,請勿超過一個月 。如果一次無法用完一瓶 ,可將40~45ml分裝於無菌50ml離心管中 ,由於血清結凍時體積會增加約10% , 必須預留此膨脹體積之空間 ,否則易發生汙染或容器凍裂之情形 。

2.一般廠商提供之血清為無菌 ,不需再無菌過濾 。若發現血清有許多懸浮物 ,則可將血清加入培養基內一起過濾 ,勿直接過濾血清 。!`%V5
3.瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天 ,至室溫下全溶後再分裝 ,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml 。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡) ,使溫度與成分均一 ,減少沈澱的發生 。勿直接由20℃直接至37℃解凍 ,因溫度改變太大 ,容易造成蛋白質凝結而發生沈澱 。
4.熱滅活是指56℃,30分鍾加熱已完全解凍之血清 。加熱過程中須規則搖晃均勻 。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement)去活化 。除非必須 ,一般不建議作此熱處理 ,因為會造成沈澱物之顯著增多 ,且會影響血清之品質 。補體受到破壞 。
5.勿將血清置於37℃太久 ,若在37℃放置太久,血清會變得混濁 ,同時血清中許多較不穩定之成份亦會因此受到破壞 ,而影響血清之品質 。
6.血清之沈澱物
6.1.凝絮物 :發生之原因有許多種 ,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍後血清中存在之血纖維蛋白(fibrin)造成 ,這些凝絮沈澱物不會影響血清本身之品質 。若欲減少這些凝絮沈澱物 ,可用離心3000rpm,5min去除 ,或離心後上清液可以加入培養基中一起過濾 。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈澱物 ,因為會阻塞過濾膜 。生物
6.2.顯微鏡下觀察之“小黑點 :通常經過熱處理之血清 ,沈澱物的形成會顯著的增多 。有些沈澱物在顯微鏡下觀察像是小黑點 ,常會誤認為血清遭受汙染 ,而將血清放在37℃中欲培養此微生物 ,但在37℃環境下 ,又會使此沈澱物增多 ,更會誤認為微生物之增殖 ,但以培養細菌之培養基檢測 ,又沒有汙染 。一般而言 ,此小黑點應不會影響細胞之生長 ,但若懷疑此血清之品質 ,應立即停用 ,更換另一批號的血清 。


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