間質幹細胞的表麵抗原

通過流式細胞儀分析 ，間充質幹細胞特異性表麵抗原有 ：SH2 、SH3 、 CD29 、CD44 、CD71 、CD90 、CD106 、CD120a 、CD124 。

BMSC ：是骨髓中除HSC 以外的非造血性幹細胞 ，骨髓中絕大多數是HSC ，BMSC 隻占骨髓有核細胞的0.001%～0.01%  。因此鑒定BMSC 的方法是在骨髓的幹細胞中排除HSC——BMSC ：CD45- 、CD34- 、CD29+ 、 CD14+/ HSC：CD34+ 。

間質幹細胞的培養原理概述

間質幹細胞（mesenchymal stem cell ，MSC）是一群中胚層來源的具有自我更新和多向分化潛能的多能幹細胞 ，在適宜的培養條件下可分化成多種組織細胞 ，包括成骨細胞 、軟骨細胞 、肌肉細胞 、脂肪細胞等 。

間質幹細胞最早是從骨髓中分離得到的 ，正常情況下 ，它在骨髓中的比例非常低 ，僅占單核細胞的1/105 ~1/104 。骨髓中單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞 ，其體積 、形態和密度與其他細胞不同 ，紅細胞和多核白細胞密度較大 ，為1.090 g/ml左右 ，而淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090 g/ml ，血小板為1.030~1.035 g/ml 。為此利用一種密度介於1.075~1.092 g/ml之間而近於等滲的溶液（分層液）進行密度梯度離心 ，使一定密度的細胞按相應密度梯度分布 ，從而將各種血細胞加以分離 。常用的分層液有Ficoll和Percoll兩種 。

在骨髓的原代培養物中 ，除了貼壁生長的成纖維細胞樣的間質幹細胞外 ，還混雜著一些巨噬細胞 、單核細胞 、造血細胞及紅細胞等 ，要得到較均一的間質幹細胞 ，必須除去其他細胞 。根據其他細胞的特性 ，可采用不同的方式排除它們 。對於紅細胞 ，因其不貼壁 ，可通過換液除去 。對於貼壁的單核巨噬細胞 ，可根據其黏附能力的不同 ，通過調整Trypsin/EDTA 的消化時間 ，保證間質幹細胞在短暫的作用時間內與塑料培養瓶壁分離 ，而巨噬細胞 、單核細胞 、造血細胞等仍貼附於培養瓶壁 ，從而使間質幹細胞與其他的貼壁細胞得到分離 。

在傳代培養中 ，接種密度是影響體外培養間質幹細胞增殖潛能的重要因素 。低密度接種時 ，間質幹細胞的增殖能力明顯提高 ，而誘導細胞分化時則需要較高的細胞密度 ，這可能與分化時細胞與細胞間的相互作用有關 。而在培養過程中 ，若細胞過度融合會促進其分化趨向 ，故要保持幹細胞未分化狀態 ，要及時傳代 。