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細胞培養時如何預防細胞老化 ?

防止細胞老化主要還是要做到勤觀察 、勤換液 、勤傳代 、勤保種 ,特別是傳代 ,不能等細胞太密了之後傳 ,般細胞建議長到70%融合度傳代完好 ;換培養液應該根據自己細胞消耗培養基的情況來確定是否該換 。

選擇正確的血清與培養基 :細胞對血清特別敏感 ,直接影響細胞的生長 。定要選擇適合的血清不然就會因營養物質不協調而導致細胞老化 ;在間充質幹細胞培養時必然要進行消化 ,但是消化對細胞的表麵蛋白質有很強的破壞作用 ,因此不能長時間進行消化並且在選擇消化酶時也要選擇較為合適的pH和濃度 ,不然就會使細胞老化或者分化 。

在進行細胞培養時 ,尊龍凱時經常會聽到些業名詞,原代培養是什麽 ?什麽是世代數 ?細胞係是什麽 ?有限細胞係又代表的是什麽 ?有的有名詞搞不清楚的話 ,會對細胞培養過程也會有定的影響 。根據老師們的反饋 ,尊龍凱時總結了以下容易混淆的概念供大家參考~

1 、原代培養(Primary culture)

開始於直接取自生物體的細胞 、組織或器官的培養稱為原代培養 。通常代表異質細胞群 ,很難標準化和繁殖 。它們的壽命般有限 ,而且已知它們會隨著時間而改變其差異特征 。

2 、傳代(Passage(Subculture))

細胞從個皿裏轉移或傳代到另皿裏的過程稱為細胞傳代 。這是個操作行為 ,無法準確定義細胞分裂次數 。

3 、傳代次數(Passage number)

種細胞被傳代培養的次數稱為傳代次數 。

4 、世代數(Generation number)

種細胞所經曆的細胞數量倍增次數稱為世代數 。

5 、群體倍增時間(Population doubling time)

在對數生長期中期細胞數量翻倍所需要的時間間隔稱為群體倍增時間 。

6 、群體倍增次數(Population doubling)

在培養過程中細胞所經曆的細胞數量倍增次數稱為群體倍增次數 。

7 、細胞係(Cell line)

原代細胞經過第①次傳代後增殖的細胞稱為細胞係或亞克隆 。隨著細胞的傳代 ,生長能力強的細胞會占據優勢 ,導致細胞群體在基因型和表現型上達到定程度的均性。

8、細胞株(Cell strain)

細胞係通過選擇或克隆獲得的具有特征的細胞係稱為細胞株 。與親代細胞係起始時相比 ,細胞株往往會獲得其他些遺傳學改變 。

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