1.穀氨酰胺使用方法是什麽 ？

答 ：穀氨酰胺在溶液中很不穩定 ，故4℃下放置1周可分解50% ，使用中單獨配製 ，置-20℃冰箱中保存 ，用加入培養液中。

2.碳酸氫鈉在室溫條件存放是否穩定 ？

答 ：碳酸氫鈉白色粉末 ，或不透明單斜晶係細微結晶 。比重2.159 。無臭 、味鹹 ，可溶於水 ，微溶於乙醇 。其水溶液因水解而呈微堿性 ，受熱易分解 ，在65℃以上迅速分解 ，在270℃時完全失去二氧化碳，在幹燥空氣中無變化 ，在潮濕空氣中緩慢分解 。

3.培養細胞生長減慢的原因有哪些 ？其解決辦法有哪些 ？

答 ：可能得原因有：更換了不同的培養液或血清 ；培養液中些細胞生長必需成分如穀氨酰胺或生長因子等耗盡或缺乏或已被破壞 ；培養物中有少量細菌或真菌汙染 ；試劑保存不當 ；比較新培養液與原培養液成分 ，比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗找出可能的原因 。 

解決辦法 ：增加起始培養細胞濃度 ；讓細胞逐漸適應新培養液 ；換入新鮮配製培養液 ；補加穀氨酰胺或生長因子等 ；用無抗生素培養液培養 ，如發現汙染 ，丟棄培養物 ，或用抗生素除菌 ；血清需保存在-5℃到-20℃ ；培養液需在2－8℃避光保存 ；含血清完全培養液在2-8℃保存 ，並在2 周內用完 ；分離培養物 ，檢測支原體 。

4.L-穀氨酰胺在細胞培養中重要嗎 ？它在溶液中不穩定嗎 ？

答 ：L-穀氨酰胺在細胞培養時非常重要的 。脫掉氨基後 ，L-穀氨酰胺可作為培養細胞的能量來源 、參與蛋白質的合成和核酸代謝 。L-穀氨酰胺在溶液中經過段時間後會降解 ，降解率隨保存溫度而變 。L-穀氨酰胺的降解導致氨的形成 ，而氨對於些細胞具有毒性 。

5.細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎 ？

答 ：不見得 ！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH 、溫度 、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關 。通常情況下 ，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力強 。另外 ，鈣 、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。尊龍凱時每次進行傳代消化 ，定要用D-Hanks液或PBS液反複衝洗細胞培養瓶 ，以便於將含血清的培養基衝洗幹淨 ，這樣就能大大提高消化液的消化能力 。通常使用的消化液濃度為 ： 
     （1）0.05％胰蛋白酶＋0.02％EDTA ； 
     （2）0.25% 胰蛋白酶 
     多數細胞傳代消化可使用0.25％胰蛋白酶＋0.02％EDTA這種消化液 。

6.二價離子抑製胰蛋白酶活性嗎 ？使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什麽 ？

答 ：二價離子的確抑製胰蛋白酶活性 。EDTA用來螯合遊離的鎂離子和鈣離子 ，以便保持抑製胰蛋白酶的活性 。建議胰蛋白酶處理細胞 ，用EDTA清洗細胞 ，以消除來自培養基中所有的二價離子 。

7.GlutaMAX-I是什麽 ？培養細胞如何利用GlutaMAX-I ？這個二肽有多穩定 ？

答 ：GlutaMAX-I 即穀丙氨酸二肽 ，是個L-穀氨酰胺的衍生物 ，其不穩定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護 。種肽酶逐漸裂解二肽 ，釋放L-穀氨酰胺供利用 。GlutaMAX-I二肽非常穩定 ，即使在121磅滅菌20分鍾 ，GlutaMAX-I 二肽溶液有小的降解 ，如果在相同條件下 ，L-穀氨酰胺幾乎完全降解 。